Posted by on 28 maja 2018

Próbki żółci, surowicy i wątroby pobrano 24 godziny po ostatnim wstrzyknięciu. Panel A pokazuje skrawki tkanki wątroby, które najpierw wybarwiono przeciw-króliczymi lub przeciwludzkimi przeciwciałami drugorzędowymi (zielone), a następnie inkubowano z mysim przeciwciałem przeciwko białku 2 związanym z opornością wielolekową (MRP2), a następnie przeciwciałem wtórnym sprzężonym z przeciwciałem przeciw AlexaFluor594. (czerwony). Próbki wątrobowe szczurów leczonych przeciwciałem wykazują produkty reakcji immunofluorescencji kolokalizowane ze znacznikiem kanałowym MRP2. Pokazano również reprezentatywne obrazy immunofluorescencyjne fragmentów wątroby z każdej grupy. Panel B pokazuje średnie całkowite stężenia kwasów żółciowych w próbkach żółciowych i surowicy od szczurów. T bary oznaczają standardowe odchylenia. Następnie testowaliśmy zdolność tych przeciwciał do docierania do przewodu żółciowego i zaburzania wydzielania kwasu żółciowego in vivo. Dożylnie wstrzyknięto szczurom sól fizjologiczną buforowaną fosforanem lub przeciwciałem króliczym skierowanym przeciw ludzkiemu BSEP, który reaguje krzyżowo ze szczurzym Bsep. Szczury uśmiercono, a części ich wątroby barwiono fluorescencyjnymi przeciwwstrząsowymi wtórnymi immunoglobulinami. Nie stwierdziliśmy swoistego zabarwienia skrawków wątroby szczurów, którym wstrzyknięto sól fizjologiczną buforowaną fosforanem, podczas gdy szczury wstrzyknięte przeciwciałem przeciw BSEP wykazywały barwienie kanałowe (Figura 3A). Sekwencyjna inkubacja tych samych sekcji wątroby z przeciwciałem przeciwko białku kanału MRP2 dodatkowo potwierdziła, że wstrzyknięte przeciwciało anty-BSEP zlokalizowało się przeważnie na domenach kanałowych. Podobnie, po wstrzyknięciu szczurom surowicy od Pacjenta 2, a następnie inkubacji skrawków wątroby ze sprzężonymi z fluoresceiną przeciwciałami drugorzędowymi, obserwowano wybarwianie kanalików żółciowych, podczas gdy nie było wybarwionych fragmentów ze zwierząt kontrolnych, którym wstrzyknięto ludzką IgG (Figura 3A). Szczury, którym wstrzyknięto przeciwciało anty-BSEP lub surowicę od Pacjenta 2 miały stężenia żółciowych kwasów żółciowych ogółem, które stanowiły 50,0 do 62,5% poziomów w odpowiednich kontrolach. Stężenia kwasów żółciowych w surowicy od tych zwierząt były istotnie większe niż wartości w surowicy od szczurów kontrolnych (Figura 3B).
Dyskusja
Opisujemy późny, po przeszczepie fenotypowy nawrót ciężkiego niedoboru BSEP u trójki dzieci z odpowiedzią immunologiczną przeciw BSEP. Fakt, że przeciwciała anty-BSEP u jednego z tych dzieci wiąże kanalikową błonę hepatocytów po wstrzyknięciu szczurom nie był nieoczekiwany; wykazano, że IgG może być internalizowane przez hepatocyty, a nawet transcytozowane z krwi do żółci.16,17 Skromne zmniejszenie wydzielania żółciowych kwasów żółciowych obserwowane u szczurów leczonych przeciwciałem jest zgodne z tym, że przeciwciała nie wydają się dostarczane do całej wątroby. (Nie znaleźliśmy równomiernego rozkładu wybarwienia przez te przeciwciała wśród odcinków tkanek.) Ponadto, w przeciwieństwie do ludzi, gryzonie mają transportery kwasu żółciowego inne niż Bsep.18,19
Nasze wyniki potwierdzają pogląd, że fenotypowy nawrót ciężkiego niedoboru BSEP wynika z mediowanej przez przeciwciała blokady BSEP w przeszczepach. Jest to zgodne z ustaleniami wynikającymi z kolejnej oceny mian przeciwciał podczas jednego epizodu dysfunkcji przeszczepu cholestatycznego, w którym normalizacji stanów klinicznych i wynikom testów wątrobowych w ramach coraz intensywniejszego schematu immunosupresyjnego towarzyszył stopniowy spadek miano przeciwciał
[przypisy: ubrania robocze, odzież patriotyczna, naklejka na legitymację ]

Powiązane tematy z artykułem: naklejka na legitymację odzież patriotyczna ubrania robocze

Posted by on 28 maja 2018

Próbki żółci, surowicy i wątroby pobrano 24 godziny po ostatnim wstrzyknięciu. Panel A pokazuje skrawki tkanki wątroby, które najpierw wybarwiono przeciw-króliczymi lub przeciwludzkimi przeciwciałami drugorzędowymi (zielone), a następnie inkubowano z mysim przeciwciałem przeciwko białku 2 związanym z opornością wielolekową (MRP2), a następnie przeciwciałem wtórnym sprzężonym z przeciwciałem przeciw AlexaFluor594. (czerwony). Próbki wątrobowe szczurów leczonych przeciwciałem wykazują produkty reakcji immunofluorescencji kolokalizowane ze znacznikiem kanałowym MRP2. Pokazano również reprezentatywne obrazy immunofluorescencyjne fragmentów wątroby z każdej grupy. Panel B pokazuje średnie całkowite stężenia kwasów żółciowych w próbkach żółciowych i surowicy od szczurów. T bary oznaczają standardowe odchylenia. Następnie testowaliśmy zdolność tych przeciwciał do docierania do przewodu żółciowego i zaburzania wydzielania kwasu żółciowego in vivo. Dożylnie wstrzyknięto szczurom sól fizjologiczną buforowaną fosforanem lub przeciwciałem króliczym skierowanym przeciw ludzkiemu BSEP, który reaguje krzyżowo ze szczurzym Bsep. Szczury uśmiercono, a części ich wątroby barwiono fluorescencyjnymi przeciwwstrząsowymi wtórnymi immunoglobulinami. Nie stwierdziliśmy swoistego zabarwienia skrawków wątroby szczurów, którym wstrzyknięto sól fizjologiczną buforowaną fosforanem, podczas gdy szczury wstrzyknięte przeciwciałem przeciw BSEP wykazywały barwienie kanałowe (Figura 3A). Sekwencyjna inkubacja tych samych sekcji wątroby z przeciwciałem przeciwko białku kanału MRP2 dodatkowo potwierdziła, że wstrzyknięte przeciwciało anty-BSEP zlokalizowało się przeważnie na domenach kanałowych. Podobnie, po wstrzyknięciu szczurom surowicy od Pacjenta 2, a następnie inkubacji skrawków wątroby ze sprzężonymi z fluoresceiną przeciwciałami drugorzędowymi, obserwowano wybarwianie kanalików żółciowych, podczas gdy nie było wybarwionych fragmentów ze zwierząt kontrolnych, którym wstrzyknięto ludzką IgG (Figura 3A). Szczury, którym wstrzyknięto przeciwciało anty-BSEP lub surowicę od Pacjenta 2 miały stężenia żółciowych kwasów żółciowych ogółem, które stanowiły 50,0 do 62,5% poziomów w odpowiednich kontrolach. Stężenia kwasów żółciowych w surowicy od tych zwierząt były istotnie większe niż wartości w surowicy od szczurów kontrolnych (Figura 3B).
Dyskusja
Opisujemy późny, po przeszczepie fenotypowy nawrót ciężkiego niedoboru BSEP u trójki dzieci z odpowiedzią immunologiczną przeciw BSEP. Fakt, że przeciwciała anty-BSEP u jednego z tych dzieci wiąże kanalikową błonę hepatocytów po wstrzyknięciu szczurom nie był nieoczekiwany; wykazano, że IgG może być internalizowane przez hepatocyty, a nawet transcytozowane z krwi do żółci.16,17 Skromne zmniejszenie wydzielania żółciowych kwasów żółciowych obserwowane u szczurów leczonych przeciwciałem jest zgodne z tym, że przeciwciała nie wydają się dostarczane do całej wątroby. (Nie znaleźliśmy równomiernego rozkładu wybarwienia przez te przeciwciała wśród odcinków tkanek.) Ponadto, w przeciwieństwie do ludzi, gryzonie mają transportery kwasu żółciowego inne niż Bsep.18,19
Nasze wyniki potwierdzają pogląd, że fenotypowy nawrót ciężkiego niedoboru BSEP wynika z mediowanej przez przeciwciała blokady BSEP w przeszczepach. Jest to zgodne z ustaleniami wynikającymi z kolejnej oceny mian przeciwciał podczas jednego epizodu dysfunkcji przeszczepu cholestatycznego, w którym normalizacji stanów klinicznych i wynikom testów wątrobowych w ramach coraz intensywniejszego schematu immunosupresyjnego towarzyszył stopniowy spadek miano przeciwciał
[przypisy: ubrania robocze, odzież patriotyczna, naklejka na legitymację ]

Powiązane tematy z artykułem: naklejka na legitymację odzież patriotyczna ubrania robocze